摘要：为了解河南省病死猪群常见病原分布规律，2017—2019年共对1 729份病死猪组织样品进行了猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪圆环病毒3型（PCV3）和副猪嗜血杆菌（HPS）病原学检测。结果显示：PCV2和HPS检出率较高，分别为73.68%和57.26%，其他6种病原检出率为0.75%~13.24%，混合感染率为60.15%；2018年检出病原种类最多，且病原检出率较高；春季检出病原种类最多，冬季较少；豫西、豫中地区检出病原种类较多，豫南地区较少。结果表明，河南省猪群中病原分布范围广、检出率高、混合感染严重，且具有一定的时间和空间分布特征。结果提示，河南省猪群疫病防控形势较严峻，各猪场应依据不同病原流行特点制定相应的防控措施。
病死猪无害化处理是猪产业链和疫病传播链的一个重要环节。病死猪处理不当，不仅危害生态环境，影响动物源性食品质量安全，还存在散播动物疫病的重大风险。对病死猪进行病原学监测可以掌握猪群常见疫病流行动态，找出导致猪只死亡的病原种类及其流行特点，可为猪群疫病预警和防控提供依据。本研究旨在掌握 2017—2019 年河南省病死猪常见病原感染情况及其时间和空间分布特点，以期为河南省猪群疫病防控提供参考。
1 材料
1.1 样品
采用估计流行率的抽样方法，将河南省病死猪作为目标群，以上年末存栏量为基数，按照养殖环节 8% 的死亡率计算目标群个体数量；使用 Epi-info 软件，按照计算设定的病死猪数量，设置信水平 95%、可接受误差 5%、预期流行率 50%，计算抽样数量，然后平均分配到 47 个备案的病死动物无害化处理厂，再将每个场点所需采集样品平均分配到各个季节。2017—2019 年，共采集无害化处理厂病死猪组织样品 1 729 份，同一头病死猪采集淋巴结、扁桃体、肺脏、脾脏等组织样品（混合为1 份）。其中：2017、2018 和 2019 年各检测样品526、536 和 667 份；春、夏、秋、冬四季分别采样 430、336、574 和 389 份；豫东地区（开封市、商丘市、周口市）380 份，豫西地区（洛阳市、三门峡市）277 份，豫南地区（驻马店市、南阳市、信阳市）501 份，豫北地区（新乡市、焦作、济源市、安阳市、濮阳市）287 份，豫中地区（郑州市、漯河市、平顶山市、许昌市）284 份。
1.2 主要仪器
二级生物安全柜（型号 AC2-6S1），购自新加坡 ESCO 科技有限公司；组织研磨仪（型号MM400），购自德国 Retsch 公司；全自动核酸提取仪（型号NP968），购自西安天隆科技有限公司；荧光 PCR 仪（型号 7500），购自美国 ABI 公司。
1.3 主要试剂
核酸提取试剂盒，购自苏州天隆生物科技有限公司；猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）、猪圆环病毒 2 型（PCV2）、猪圆环病毒 3 型（PCV3）和副猪嗜血杆菌（HPS）检测试剂，均为商品化实时荧光 PCR 检测试剂盒。
2 方法
2.1 病原检测
将同一头病死猪的不同组织样品（淋巴结、扁桃体、肺脏、脾脏等）混样研磨后提取核酸，进行 CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3、HPS 实时荧光 PCR 检测。核酸提取和检测均按照试剂盒说明书进行。
2.2 结果统计
将检测结果录入 Excel 软件，按年度、区域、季节进行统计分析和描述，找出各病原的时间和空间分布特征。
3 结果与分析
3.1 病原分布
共检测样品 1 729 份，其中 PCV2、HPS 检出率较高，分别为 73.68%、57.26%，CSFV、FMDV检 出 率 较 低， 分 别 为 0.75%、0.81%， 而 PRV、PRRSV、PCV3、PPV检出率介于20%~13.24%（表1）。
3.2 年度分布
2017—2019 年，除 FMDV 外，其他 7 种病原在各年度均有检出；2018 年全部 8 种病原均有检出，且 CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、HPS 检出率均较高；PPV、PCV2、PCV3 检出率呈逐年上升趋势，而其他病原大多呈波浪状变化趋势（表 2）。
3.3 季节分布
春季检出病原种类最多，所有病原均有检出，而冬季检出病原种类相对较少。春季 CSFV、PRRSV、FMDV、PRV 检出率最高，夏季 PCV2和 HPS 检出率最高，冬季 PPV 和 PCV3 检出率最高（表 3）。
3.4 区域分布
除豫南地区外，CSFV 在其他地区均有检出，检出率介于 0.70%~1.76%；FMDV 主要流行于豫西和豫中地区，检出率分别为 1.08% 和 3.87%。其他病原在全省不同地区均有检出，其中：PRRSV在豫西地区检出率最高（6.50%），PRV 豫北地区检出率最高（4.18%），PPV 豫南地区检出率较高（29.94%），PCV3豫南地区检出率最高（13.57%）；PCV2、HPS 检出率普遍较高，分别在 60.00%、40.00% 以上。具体结果见表 4。
3.5 混合感染情况
1 729 份样品中，26.20% 的样品仅检出 1 种病原。病原感染以混合感染为主，同一份样品检出 2 种及以上病原的占样品总数的 60.15%。其中：2 种病原混合感染样品 816 份，主要为“PCV2+HPS”“PCV2+PPV”“PCV2+PCV3”，占样品总数的 47.19%；3 种病原混合感染样品187 份， 主 要 为“PCV2+HPS+PCV3”“PCV2+HPS+PRRSV”“PCV2+HPS+PPV”， 占样品总数的 10.82%；4 种病原混合感染样品 32 份，主要为“PCV2+HPS+PCV3+PPV”“PCV2+HPS+PCV3+PRV”“PCV2+HPS+PCV3+PRRSV”， 占样品总数的 1.85%；5 种病原混合感染样品 5 份，分别为“PCV2+HPS+PCV3+PPV+PRRSV” 和“PCV2+HPS+PCV3+PPV+PRV”，占样品总数的0.29%。具体结果见表 5。
4 讨论
2017—2019 年，共检测无害化处理厂病死猪样 品 1 729 份， 结 果 CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3 和 HPS 等 8 种常见病原均有检出。不同年度检测结果显示，大多数病原的检出率具有一定的波动性，仅 PPV、PCV2 和PCV3 检出率呈逐年上升趋势，因此这 3 种病原应引起生猪养殖场户高度重视并加强控制。
8 种常见病原不同季节的检出率有所不同，多数病原具有一定的季节分布特征。CSFV、PRRSV、FMDV、PRV 春夏季检出率较高，其中FMDV 仅在春季检出；PPV 和 PCV3 秋冬季检出率较高；PCV2 全年检出率均较高，不同季节检出率均在 60% 以上；HPS 冬季检出率最低，这符合细菌病流行特征。
不同地区病死猪检测结果显示，8 种病原分布范围较广，但各病原在不同地区的检出情况略有不同。豫南地区未检出 CSFV，FMDV 仅在豫西和豫中地区检出，而其他 6 种常见病原在各个地区均有检出。因此，生猪养殖场户可依据不同区域的病原流行特点，采取相应的控制措施，以减少猪群发病。
在 1 729 份样品中，有 1 040 份样品检出 2 种及以上病原，说明病死猪混合感染情况较严重。混合感染样品中，均有 PCV2 检出，说明河南省猪群中 PCV2 感染较为广泛，应引起关注。PCV2 感染猪只后，可引起猪只免疫抑制，从而继发感染其他病原，这可能是混合感染样品中均有 PCV2 检出的一种重要因素。
病死猪运输或无害化处理不当，将产生散播疫病风险。各地可借鉴、推广病死猪无害化处理保险联动模式，设置无害化处理设施设备配置补助经费，同时提高病死动物无害化处理补助水平。建议规模化养猪场配备与其规模相应的病死猪无害化处理设施设备，争取做到病死猪不出场处理，以降低疫病散播风险。
5 结论
调查发现，河南省病死猪中 CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3 和 HPS 等 8种常见病原分布范围广、检出率高、混合感染严重，且具有一定的时间和空间分布特征，表明河南省猪群疫病防控形势较为严峻。调查提示，猪场应做好日常监测预警，掌握疫病流行态势并采取相应的防控措施，以保障养猪业健康稳定发展。
